[기기 설명]
형광(광학)현미경의 일종이며, 레이저를 광원으로 형광 표지된 시료의 구조나 형태변화, 특성 발현을 고해상도 이미지화 및 상대 정량분석하는 장비이다. 투과성이 높은 레이저와 pinhole 장치를 이용하여 물리적 절단없이 시료 내부를 관찰하고 Z stack으로 3차원 영상(3D)을 형상화, 특정자극에 따른 실시간 이미지 획득이 가능한 장비이다.
Confocal laser scanning microscope의 가장 큰 특징은 Confocal Mode에서 시료를 광학적으로 section 하여 Blurring이 없는 선명한 광학적 절편 상을 얻는 것이다. 따라서 시료에 일체 손상이 없이 그 형태 및 내부 구조를 시각화 할 수 있으며 전용의 투과광 Detector에 의해 고해상도의 투과광상과 함께 염색체, 세포 등 시료의 3차원 구조 및 미세 형태 해석에 유용하다.
Confocal의 원리를 이용하여 정확하게 focus가 맞는 image만을 얻을 수 있어 세포 내부 및 외부의 정보를 고해상도로 얻을 수 있다. 발생학, 생화학, 세포생물학, 세포 생리학, 분류학, 해부학에 이르기까지 넓은 부분에 걸쳐 많은 응용부분을 지니고 있다. LSM 880시스템은 기존의 필터 system 기능에서 벗어나 새로운 Beam Splitter를 장착하였다. 이러한 Detector는 파장에 따른 Scanning을 한 후 고유의 Spectrum 지문 (Spectrum Finger printing)을 얻고, Lambda Stack이란 기능으로 각각의 특정의 형광파장을 갖은 spectral data를 얻게 되는데 얻어진 spectral database에 의해 unmixing 기능으로 cross talk가 제거된 화상을 작성 할 수 있다. 또한 전동식 Stage를 장착하여 tile scan image 획득도 가능하다
[기기 사용 효과]
○ 형광으로 염색 되어진 시료의 3차원 구조 파악 가능
○ 세포내에서 물질의 이동을 실시간으로 관찰
○ 다양한 형광물질을 이용한 생체내 특정 물질의 분포관찰
○ 세포내 소기관 또는 단백질과 같은 거대분자의 세포내 구조 관찰
○ 다중형광 염색시료의 관찰시 cross-talk 적음 (cross talk : 형광의 spectral 이 겹쳐져 있는 현상)
○ 정량 형광 분석 가능 (colocalization 등)
